双荧光素酶报告基因检测
荧光素（Luciferase）是自然界中能够产生生物发光的酶的统称，其中萤火虫荧光素 F-Luciferase 和海肾荧光素 R-Luciferase 最具有代表性。目前，双荧光素酶通常是指萤火虫荧光素酶和海肾荧光素。这两种酶的主要区别：1. 物种来源不同；2. 它们的底物和辅因子不同；3. 发光的颜色不同。萤火虫萤光素酶是一种胞内蛋白，从甲虫（
2022-11-11
原代细胞分离培养都有哪几种方法？
研究中常用的细胞系/株系是现成的，我们只需要进行细胞传代和种子保存。然而，这些细胞系往往因长期体外培养而失去原有的生物学特性，对药物治疗的反应差距越来越大。因此，越来越多的人选择原代细胞。来源于胚胎、组织、器官和外周血，经特殊分离方法制备的原代培养细胞称为原代细胞。原代细胞培养，也称为原代培养，
2022-11-10
SD大鼠乳鼠心脏微血管内皮细胞原代分离培养方法
1.将新生24h的SD大鼠用75%乙醇浸泡5min，开胸，取出心脏后于含有双抗的预冷过的D-HANKS中漂洗两遍，移入超净台。2.仔细剪除大血管，左右心房及右心室和室间隔，保留左心室，去除内、外膜，PBS清洗。3.用眼科剪将心室肌剪碎至约1mm3，滴加1ml胎牛血清，均匀接种于6cm细胞培养皿内，组织块间隔1-2mm，放入5% CO2，37℃恒温培养
2022-11-09
SD大鼠牙髓干细胞原代分离培养方法
1. 处死动物，分离下颌骨，自中缝处将其分为两半。2. 打开髓腔，取出牙髓，去除顶端的apical button，在培养皿中用显微剪剪碎，注意冰上操作。3. 将牙髓转入15ml离心管中，终浓度1.5mg/ml的Collagenase I于37℃，5% CO2条件下消化40min。4. 加入完全培养基（MEM+10%FBS+1%双抗）终止消化，4℃，360g离心10min收集沉淀。5. P
2022-11-09
宏基因组测序mNGS在新型冠状病毒检测中的应用
此次新型肺炎疫情监测和防控中，病原宏基因组测序（mNGS）发挥了至关重要的作用，利用其技术优势，研究人员在5天内就鉴定分析出新型冠状病毒的基因组，而2003年SARS的鉴定耗时5月余、2013年H7N9的鉴定耗时1月余。2020年2月5日，武汉大学病毒学国家重点实验室、武汉大学中南医院、华中科技大学同济医学院附属同济医院和中山大
2022-11-03
肠道微生物调节机体对心血管药物的反应
心血管疾病（CVD）仍然是全球范围内主要的死亡原因。肠道菌群的改变与动脉粥样硬化，血脂异常，高血压和心力衰竭有关。微生物群具有代谢药物的能力，这引起了药物药代动力学和药效学改变或形成有毒代谢物，从而干扰药物的反应。早期有证据表明，肠道微生物组可调节对机体对他汀类药物和降压药物的反应。因此，肠道微生物组对
2022-11-03
肝脏EV转运miRNA调控脂肪组织重塑的机制研究
2020年2月5日，南京大学医学院赵越、方雷、李朝军团队的最新研究发表在国际著名学术期刊《Nature Communications》上（影响因子11.878），题目为《Liver governs adipose remodelling via extracellular vesicles in response to lipid overload》，本文揭示了在营养过剩状态下，肝脏感知机体营养状态，重塑脂肪组织功能，调
2022-11-02
单细胞测序在终末期肾病(ESRD)研究中的应用
慢性肾脏病（CKD）已成为一项全世界公共的健康问题，患病率和医疗花销不断走高，给个人和政府都造成了沉重的经济负担。终末期肾病（ESRD）患者是肾功能逐渐丧失的晚期患者，其并发症和死亡风险非常高，而且预期寿命也明显短于普通人群。通常，免疫异常被认为是并发症的催化因素，也是导致ESRD死亡的主要危险因素之一。在过去
2022-11-02
单细胞测序在AD研究中的应用
阿尔茨海默病（Alzheimer's disease, AD）是一种普遍存在的神经退行性疾病，迄今为止，我们对该疾病的分子和细胞复杂性仍知之甚少。美国麻省理工学院的研究人员首次对阿尔茨海默病患者的前额皮质中表达的基因进行了综合分析。他们通过分析鉴定出了在神经元和其他类型的脑细胞中受影响的独特细胞通路，相关研究结果发表在
2022-11-01
单细胞转录组测序揭示衰老细胞的异质性
单细胞转录组测序揭示端粒侵蚀诱导的衰老细胞异质性自2009年单细胞转录组测序技术（scRNA-seq）问世以来，在过去的十年里，scRNA-seq技术得到了蓬勃的发展，从而使得可在单细胞水平揭示全基因组范围内所有基因的表达情况，可以更精准的开展细胞表达异质性研究、鉴定新的细胞亚型、描绘细胞发育路径、鉴定分子Marker等。目前
2022-11-01
单细胞测序专题—骨相关研究
近年来，骨科学在诊断、治疗、科研方面都取得了极大的进展。然而，随着中国社会人口老龄化的进展，因老年性骨质疏松引起的骨折和关节病逐渐增多；随着私家交通工具的广泛普及，因交通事故引起的骨创伤明显增多；随着日益严重的环境污染，骨肿瘤和类风湿性关节炎等疾病也相应增多。现代骨科病谱发生了很大变化，因此，骨科学
2022-10-31
单细胞测序专题—脓毒血症
脓毒症（sepsis）是指由感染引起的全身炎症反应综合征。脓毒症具有“三高”特点：患病率高、病死率高、治疗费用高。全球每年脓毒症患病人数超过1900万，脓毒症病情凶险，治疗花费高，已经成为临床危重病患者的重要死亡原因之一。即使治愈后存活的患者，也可能存在认知功能障碍，严重影响人类的生活质量，对人类健康造成极大
2022-10-31
Molecular Therapy | 低氧刺激诱导小鼠胚胎干细胞肌源性谱系分化
正常情况下，空气中氧气浓度为21%左右。而人类的生存离不开氧气，但是，适当的低氧微环境对人类的生长发育有着重要作用。在此，我们将为大家分享一篇发表在Molecular Therapy (IF8.986)期刊的文章“The MicroRNA-92a/Sp1/MyoD Axis Regulates Hypoxic Stimulation of Myogenic Lineage Differentiation i
2022-10-28
原代心肌细胞的应用 | SCI分享
随着生命科学技术的进步，越来越多的生物医学实验中采用原代细胞作为材料开展实验研究。相比于细胞系，原代细胞更接近活体内的细胞状态。因此，在体外研究中，以原代细胞作为实验材料得到的实验结果更具有说服力。 以原代心肌细胞 为例，其作为一种重要的研究模型被广泛应用于心血管研究之中。下
2022-10-28
C57小鼠皮肤成纤维细胞原代培养方法
-Experimental methods-C57小鼠皮肤成纤维细胞原代培养方法一起来看一下吧实验步骤 ①将实验小鼠脱颈处死，75%乙醇浸泡5min，固定，备皮，取背部皮肤至于含双抗的冷PBS缓冲液中。②仔细剥离脂肪，血管等多余组织，PBS清洗，加胰酶消化1h。③分离真表皮，去除表皮后，PBS清
2022-10-27